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    干粉培養基在使用之前必須進(jìn)行滅菌處理

    點(diǎn)擊次數:1630 發(fā)布時(shí)間:2022-03-15
       干粉培養基在使用之前必須進(jìn)行滅菌處理,將其所含活菌全部殺死或全部除去。常用的滅菌方法有過(guò)濾除菌、干熱滅菌、濕熱滅菌及輻照滅菌等。

      其中,濕熱滅菌法又包括四種方式:煮沸法、流動(dòng)蒸汽滅菌法、間歇滅菌法和壓力蒸汽滅菌法。通常來(lái)說(shuō),使用比較多的是壓力蒸汽滅菌法。

      但是對于有些培養基來(lái)說(shuō),高壓條件會(huì )損壞培養基中的某些成分,不利于培養基的使用,所以只能采用煮沸滅菌的處理方法。

      接下來(lái)主要就煮沸滅菌方法進(jìn)行討論,話(huà)不多說(shuō)一起看看吧。

      一、煮沸滅菌的常見(jiàn)表述

      有關(guān)煮沸滅菌的描述,通常有如下幾種方式:

      a、稱(chēng)取本品41.5g,加熱溶解于1000ml蒸餾水中,煮沸不要超過(guò)2分鐘。無(wú)需高壓滅菌。臨用時(shí)制備,不得超過(guò)3小時(shí)。(參考VRBA培養基:點(diǎn)擊查看)

      b、稱(chēng)取本品50.3g,加入1000ml蒸餾水中,加熱煮沸至*溶解,冷至45-50℃,搖勻,傾入無(wú)菌平皿備用。無(wú)需高壓滅菌。(參考BS培養基:點(diǎn)擊查看)

      c、稱(chēng)取本品89g,煮沸溶解于1000ml蒸餾水中,冷至45-50℃時(shí),傾入無(wú)菌平皿,備用。注:無(wú)需高壓滅菌。(參考TCBS培養基:點(diǎn)擊查看)

      d、稱(chēng)取本品57g,加熱攪拌溶解于1000ml蒸餾水中,不要過(guò)分加熱,冷至50-55℃時(shí),傾入無(wú)菌平皿,部分開(kāi)蓋干燥2h,然后蓋上,備用。無(wú)需高壓滅菌。在 24小時(shí)內使用。(參考XLD培養基:點(diǎn)擊查看)

      這些方法描述中,都特別強調“無(wú)需高壓滅菌”、“不要過(guò)分加熱”、“煮沸充分溶解”,那么究竟該怎樣操作,才能達到既滅菌*又盡量降低對培養基的破壞呢?

      二、煮沸滅菌的實(shí)際操作

      1、關(guān)于煮沸方式,有人提出可以隔水煮沸,但經(jīng)過(guò)反復試驗,發(fā)現這種煮沸方式存在兩大弊端:①溫度不夠,達不到滅菌效果;②經(jīng)隔水煮沸的含瓊脂培養基,在水浴的過(guò)程中易出現分層現象。

      2、為了對培養基進(jìn)行有效煮沸滅菌,根據我們實(shí)踐摸索,建議如下操作:

     ?、贉蕚浜秒姶艩t和搪瓷缸(不要用鐵質(zhì)容器);

     ?、趯⑴囵B基按比例加水,稱(chēng)量至搪瓷缸中,用玻璃棒不斷攪拌,直至*溶解、無(wú)明顯團狀物或顆粒;

     ?、蹖⑻麓筛字糜陔姶艩t上,大火燒開(kāi),期間持續攪拌,避免糊底;當液面*沸騰后,立即將搪瓷缸從電磁爐上拿開(kāi),算是一次煮沸操作;液面回落后,立即放回電磁爐,重復上面的步驟;總共煮沸3次即可。

     ?、軐⒅蠛玫呐囵B基冷卻至需要的溫度,進(jìn)行傾注平皿等操作。

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