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    在配置顆粒培養基過(guò)程中偶爾會(huì )出現不凝固一搖晃就破碎現象原因

    點(diǎn)擊次數:2431 發(fā)布時(shí)間:2022-05-12
      在微生物培養時(shí)經(jīng)常會(huì )用到顆粒培養基,但是,在配制培養基過(guò)程中偶爾會(huì )出現不凝固、半凝固或者一搖晃培養基就破碎的現象,這是什么原因?
     
      大量文獻指出,瓊脂的凝固程度主要受到PH值和瓊脂含量的影響,PH值較低(≤4.0)時(shí),PH值是影響凝固等級的主要因素;PH值較高(5.0~8.0)時(shí),瓊脂濃度是影響凝固等級的主要因素。
     
      藥典上培養基配方中明確規定了PH值和瓊脂含量,如配制操作正常,凝固應是不會(huì )出現問(wèn)題的。為此,我們針對培養基出現的凝固異常進(jìn)行了分析及試驗:
     
      一、培養基PH值問(wèn)題:培養基滅菌前后PH值有何變化?經(jīng)查閱大量相關(guān)學(xué)術(shù)研究,不同培養基滅菌前后PH普遍有這樣的變化超勢:高壓滅菌前pH值4.5-8.0的培養基滅菌后pH值變化較小,偏酸性的略上升,偏堿性的略下降。但酸性或堿性較強的培養基滅菌前后PH值變化較大。因我們常使用的培養基pH值均在4.5-8.0范圍內,所以偶爾出現的培養基凝固不好應不是PH值影響的。
     
      二、瓊脂問(wèn)題:瓊脂是培養基zui常用的凝固劑,是一種海藻多糖,PH在4-10之間才會(huì )形成凝膠,且其凝膠強度和瓊脂糖的濃度有關(guān)。目前我們實(shí)驗室使用的均是成熟配方的培養基,為什么會(huì )偶爾出現凝固不好的現象呢?
     
      在仔細核查了瓊脂粉的生產(chǎn)廠(chǎng)家、批號、保質(zhì)期及配制時(shí)的稱(chēng)量、溶解、定容和轉移等過(guò)程。排除了瓊脂粉質(zhì)量問(wèn)題,但發(fā)現培養基分裝準備高溫滅菌時(shí),有部分經(jīng)開(kāi)水溶解的瓊脂呈細小顆粒狀沉在瓶底,即未*溶解,后查閱資料發(fā)現,瓊脂加熱至95℃時(shí)才開(kāi)始溶解,說(shuō)明我們用熱水溶解瓊脂時(shí),瓊脂未能*溶解,這可能是導致培養基難凝固的原因。
     
      于是我們在配制顆粒培養基時(shí),先將瓊脂煮沸5分鐘后再分裝、滅菌,后培養基冷卻至40℃時(shí)能*凝固。自瓊脂溶解方式改變后,便未再出現培養基不凝固、半凝固或者一搖晃培養基就破碎的現象。
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